An activating mutation in the CRHR1 gene is rarely associated with pituitary-dependent hyperadrenocorticism in poodles

OBJECTIVES: Pituitary-dependent hyperadrenocorticism is the most common cause of naturally occurring hypercortisolism in dogs. CRHR1 expression in human and dog corticotrophinomas suggested that this gene affects pituitary tumorigenesis. The present study aimed to investigate mutations in the CRHR1 coding region in poodles with pituitary-dependent hyperadrenocorticism. METHODS: Fifty poodles with pituitary-dependent hyperadrenocorticism and 50 healthy poodles were studied. Genomic DNA was amplified by PCR and analyzed by Sanger sequencing. RESULTS: The novel CRHR1 p.V97M mutation was identified in one dog. This valine residue, located in the amino-terminal extracellular domain, exhibits high affinity for its corticotropin-releasing hormone (CRH) ligand. Bioinformatic analysis revealed structural rearrangements in the mutant protein, with a 17% increase in the surface binding affinity between CRHR1 and CRH. In vitro functional studies showed that mutant CRHR1 induced higher ACTH secretion than the wild type after stimulation with human CRH. CONCLUSION: These results suggest that germline activating mutations in CRHR1 may be a rare cause of pituitary hyperadrenocorticism in poodles.

Breast cancer metastasis to the pituitary gland / Metástase de câncer de mama para a hipófise

Metastatic tumors to the pituitary gland are an unusual complication typically seen in elderly patients with diffuse malignant disease. Breast and lung are the commonest sites of the primary tumor. Prognosis of patients with breast cancer metastasis is poor and depends on the primary neoplastic extension. We report a 54 year-old woman with breast cancer metastasis to the pituitary stalk first diagnosed because of visual disturbance with no other symptoms. Pituitary gland stalk metastasis is a very uncommon find and this case report includes a literature review.

Os tumores hipofisários malignos são raros e geralmente se constituem de metástases de neoplasias disseminadas. Câncer de mama e pulmão são os sítios primários mais frequentes e o prognóstico depende do grau de comprometimento da doença. Este é o relato do caso de uma mulher de 54 anos que apresentou uma lesão tumoral restrita à haste hipofisária, que se revelou como metástase do câncer de mama previamente conhecido. O acometimento da haste hipofisária é muito raro, motivo pelo qual descrevemos o caso com a revisão da literatura específica.

Qualidade e quantidade do leite produzido por cabras da raça Saanen submetidas a estresse por três dias consecutivos / Quality and quantity of milk produced by Saanen goats submitted to stress during three sequential days

Estudou-se o efeito do estresse fisiológico, via administração pontual de ACTH, sobre os níveis de cortisol e a quantidade e qualidade do leite produzido. Para tanto, 12 cabras da raça Saanen foram alocadas em dois grupos experimentais: o grupo ACTH recebeu 0,6 UI de ACTH/kg PV, e o grupo placebo recebeu solução placebo. A produção de leite, os percentuais de proteína, gordura e lactose e a contagem de células somáticas (CCS) do leite foram mensurados antes, durante e após a administração de ACTH e do placebo. Simultaneamente à administração de ACTH e placebo por três dias consecutivos, foram realizadas colheitas de sangue para mensuração dos teores de cortisol. Nos tempos -30 e zero, ambos os grupos apresentaram concentrações basais de cortisol. O aumento nos níveis de cortisol foi significativo nos tempos 60min (grupo ACTH: 59,00±5,70 e grupo placebo: 5,23±1,37ng/mL) e 120min (grupo ACTH: 47,96±9,72 e grupo placebo: 4,38±1,14ng/mL), pois a concentração de cortisol foi maior no grupo ACTH. Os valores retornaram ao basal no tempo 300min. Não houve diferenças na produção leiteira entre os grupos ACTH e placebo, tampouco de proteína, gordura, lactose e CCS do leite dos grupos, portanto o estresse induzido por três dias consecutivos não trouxe prejuízos à produção.

The experiment aimed to study the effect of physiological stress on cortisol levels, quality and quantity of milk through punctual administration of ACTH. Twelve Saanen goats were divided in two experimental groups: ACTH group (0,5±g of ACTH/Kg.L.W); Placebo group (placebo solution). Milk production, and percentages of protein, fat, lactose and SCC (somatic cells counting) of the milk were analyzed before, during and after the administration of ACTH/placebo. Simultaneously to the ACTH/placebo administration and during three sequential days, blood was collected to evaluate cortisol concentrations. At times -30 and zero, both groups presented basal concentrations of cortisol. The increase of cortisol contents was significant at times 60 (group ACTH: 59.00±5.70 and groups placebo: 5.23±1.37ng/mL) and 120 (group ACTH: 47.96±9.72 and group placebo: 4.38±1,14ng/mL) since the cortisol content was higher on the ACTH group. The values returned to the basal level at 300 minutes. Concerning milk production, no differences were found between ACTH and placebo groups. Milk, protein, fat, lactose and SCC did not distinguish one group from another. The results indicated that the physiological stress induced during three days was not harmful to milk production and milk quality of Saanen goats.

Evaluación por inmunohistoquímica de la expresión de hormonas hipofisiarias y del marcador de proliferación celular Ki-67 en tejido de adenomas causantes de acromegalia / Immunohistochemistry for pituitary hormones and Ki-67 in growth hormone producing pituitary adenomas

Background: Growth hormone (GH) producing adenomas, frequently express several hormones. This condition could confer them a higher proliferative capacity. Ki-67 is a nuclear protein antigen that is a marker for proliferative activity. Aim: To measure the immunohistochemical hormone expression in pituitary adenomas, excised from patients with acromegaly. To determine if the pluríhormonal condition of these adenomas is associated with a higher proliferative capacity, assessed through the expression of Ki-67. Material and methods: Forty one paraffin embedded surgical samples of pituitary adenomas from patients with acromegalia were studied. Immunohistochemistry for GH, prolactin (PRL), follicle stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH), thyroid stimulating hormone (TSH), adrenocorticotropin (ACTH) and for the expression of Ki-67 was carried out. Results: All samples were positive for GH. Twenty seven had positive staining for PRL, 12 had positive staining for glycoproteic hormones and 11 for PRL and one or more glycoproteic hormones. Mean staining for Ki-67 was Z.6±3.3 percent. There were no differences in the expression of this marker between mono or pluríhormonal tumors. The expression was neither associated with extrasellar extensión. Conclusions: Half of GH producing pituitary adenomas are pluríhormonal. There are no differences in the expression of Ki-67 between mono and plurihormonal adenomas.

Report pf bilateral inferior petrosal sinus sampling in Iran

The differential diagnosis of ACTH-dependent Cushing syndrome is a challenging issue for clinical endocrinologists. MRI is commonly used to diagnose Cushing disease and remains the obvious technique to identify pituitary microadenomas in a noninvasive manner but it has proved to be problematic in some cases

Silent corticotroph adenomas

Silent corticotroph pituitary adenomas (SCA) are defined as pituitary adenomas showing positive staining for adrenocorticotrophic hormone in immunohistochemical studies, but not associated with perioperative clinical or laboratory features of hypercortisolaemia. They account for 1.1-6 percent of surgically removed pituitary adenomas. Currently, two distinct pathologic subtypes of SCA are recognised. Their pathogenesis remains unclear. They present with local mass effects (headache, visual deterioration, cranial nerve palsies, endocrine dysfunction). The lack of manifestations of cortisol excess has not been conclusively explained. In surgical series, most tumours are macroadenomas with suprasellar extension present in 87-100 percent of the cases; this is in contrast to Cushing's disease, which is mostly attributed to microadenomas. Surgery remains the main therapeutic approach. Attempts to identify predictors of recurrence have not been successful. Management and follow-up protocols should be planned taking into account their potential aggressive behaviour, particularly upon recurrence. The development of florid pituitary Cushing's syndrome and local recurrence followed by metastatic disease (occasionally outside the central nervous system) have been rarely reported.

Adenomas corticotróficos silenciosos (ACS) são definidos como adenomas hipofisários que apresentam coloração positiva para o hormônio adrenocorticotrófico em estudos imuno-histoquímicos, mas não são associados com achados clínicos ou laboratoriais peri-operatórios de hipercortisolemia. São responsáveis por 1,1-6 por cento dos adenomas hipofisários removidos cirurgicamente. Atualmente, dois subtipos patológicos distintos de ACS são reconhecidos, mas sua patogênese permanece obscura. Eles se apresentam com efeitos de massa local (cefaléia, deterioração visual, paralisia de nervos cranianos, disfunção endócrina). A ausência de manifestações de excesso de cortisol não é suficientemente explicada. Em séries cirúrgicas, a maioria dos tumores são macroadenomas com extensão suprasselar, presente em 87-100 por cento dos casos, em contraste com a doença de Cushing, que é principalmente atribuída a microadenomas. A cirurgia continua a principal ação terapêutica. A tentativa de se identificar preditores de recorrência tem sido mal sucedida. Protocolos de manejo e acompanhamento devem ser planejados levando-se em consideração o seu comportamento potencialmente agressivo, particularmente na recorrência. Raramente tem sido reportado o desenvolvimento de síndrome de Cushing hipofisária florida e recorrência local, seguida de doença metastática (ocasionalmente fora do sistema nervoso central).

Biomarcadores de estresse em ratos exercitados por natação em intensidades igual e superior à máxima fase estável de lactato / Biomarkers of stress in rats exercised in swimming at intensities equal and superior to the maximal estable lactate phase

INTRODUÇÃO: O estresse alcançado durante exercício agudo/crônico é relevante, pois altos índices de estresse podem prejudicar o bem-estar dos animais. As concentrações dos hormônios adrenocorticotrófico (ACTH) e corticosterona, bem como as concentrações de ácido ascórbico e colesterol das glândulas adrenais são importantes biomarcadores de estresse. OBJETIVO: Analisar a sensibilidade de diferentes biomarcadores de estresse em ratos durante exercício agudo de natação em diferentes intensidades. MÉTODO: Ratos (18) adaptados à natação foram submetidos a três testes de 25 minutos suportando cargas 5,0; 5,5 e 6,0 por cento do peso corporal (PC), para obtenção da máxima fase estável de lactato (MFEL). Em seguida, os animais foram divididos em dois grupos: M (n = 9), sacrificado após 25 minutos de exercício na intensidade de MFEL e S (n = 9), sacrificado após exercício exaustivo, em intensidade 25 por cento superior a MFEL. Para comparações, um grupo controle C (n = 10) foi sacrificado em repouso. RESULTADOS: As concentrações séricas de ACTH e corticosterona foram superiores após exercício em ambas as intensidades comparadas com o grupo controle (P < 0,05). As concentrações de ACTH e corticosterona do grupo S foram, ainda, maiores do que as do grupo M (P < 0,05). As concentrações de colesterol e ácido ascórbico na adrenal dos grupos exercitados (M e S) foram inferiores às do grupo controle (P < 0,05). Não houve diferença das concentrações de ácido ascórbico e colesterol da adrenal quando comparadas as duas intensidades de exercício (M e S) (P < 0,05). CONCLUSÃO: Todos os biomarcadores do eixo HHA apontaram alterações no nível de estresse de ratos submetidos a exercício agudo de natação; as concentrações séricas de ACTH e corticosterona mostraram-se mais sensíveis a pequenas alterações na intensidade do exercício.

INTRODUCTION: The level of stress during acute/chronic exercise is important, since higher levels of stress may impair animal welfare. The adrenocorticotrophic (ACTH) and corticosterone hormone concentrations, as well as cholesterol and ascorbic acid concentrations in adrenal gland, are considered an important stress biomarker. PURPOSE: To analyze the sensitivity of the different biomarkers during acute swimming exercise in different intensities performed by rats. METHODS: Male Wistar adult rats (n = 18) previously adapted to swimming were submitted to three 25 min. swimming tests with loads of 5.0; 5.5 and 6.0 percent of their body weight (BW), for maximum lactate steady state (MLSS) determination. After MLSS attainment, the animals were divided into two groups: M (n = 9) sacrificed shortly after a 25 min. session of exercise at the MLSS intensity or S (n = 9) sacrificed after exhaustive exercise at intensity 25 percent above MLSS. For comparison purposes, a control group C (n = 10) was sacrificed in rest. RESULTS: Serum ACTH and corticosterone concentrations were higher after exercise for the two groups (M and S) when compared with control group C (P < 0.05). The group S presented higher concentrations for both hormones in relation to the group M (P < 0.05). The concentrations of the cholesterol and ascorbic acid in adrenal were lower after exercise for the two groups (M and S) when compared with control group C (P < 0.05). No significant differences in adrenal ascorbic acid and cholesterol levels were observed when the two exercise intensities (M and S) were compared (P < 0.05). CONCLUSION: All biomarkers of HPA activity pointed alterations in the stress level of the rats submitted to acute swimming exercise. ACTH and corticosterone serum concentrations showed to be more sensitive to small alterations in the effort intensity.

Salivary cortisol to assess the hypothalamic-pituitary-adrenal axisin healthy children under 3 years old

OBJETIVO: Estabelecer intervalos de concentrações referenciais de cortisol salivar em crianças saudáveis, nos períodos matutino e vespertino, verificando os fatores de interferência nessa dosagem e a possibilidade de presença de ritmo circadiano. MÉTODOS: Pesquisa observacional controlada, incluindo aleatoriamente 91 crianças com idade de 45 dias a 36 meses, residentes em comunidade de Santo André (SP). Critérios de inclusão: nutridas, saudáveis, sem febre ou uso de corticóide, subdivididas em faixas etárias (cinco subgrupos) com intervalo de 6 meses. Houve coleta de saliva domiciliar nos períodos manhã e tarde para dosagem de cortisol, sob radioimunoensaio com anticortisol 3-oxima-albumina bovina. RESULTADOS: Os cinco subgrupos apresentaram dosagens matutinas superiores às vespertinas (p < 0,001), com diferença superior a 30 por cento a partir de 1 ano de idade. Valor médio em nmol/L foi de 557,86 (manhã) e 346,36 (tarde). Observou-se correlação linear negativa na dosagem matutina para horas de repouso e freqüência de dieta (p < 0,05); na vespertina, para medidas antropométricas (p < 0,05). CONCLUSÕES Foram estabelecidos valores de referência de normalidade de cortisol salivar em crianças saudáveis, e aos 45 dias foi possível observar ritmo circadiano, que atingiu maturidade aos 12 meses de vida. Privações de sono e dieta elevaram valores de cortisol matutino.

OBJECTIVE: To establish reference concentration intervals for salivary cortisol in healthy children, in the morning and in the afternoon, investigating factors that interfere with the concentration measured and the possibility that circadian rhythms are present. METHODS: A controlled observational study was carried out with 91 children aged 45 days to 36 months, selected at random and living in Santo André, state of São Paulo, Brazil. Inclusion criteria were: healthy, well-nourished, free from fever and corticoid use, subdivided by age group (five subsets) at 6-month intervals. Saliva was collected during home visits in the morning and afternoon. Cortisol was radioimmunoassayed with cortisol 3-oxime-bovine albumin antiserum. RESULTS: The five subsets exhibited higher cortisol concentration during the morning than in the afternoon (p < 0.001), and this difference passed 30 percent from 1 year of age onwards. Mean concentrations, in nmol/L, were 557.86 (morning) and 346.36 (afternoon). A negative linear correlation was observed between morning concentrations and hours' sleep and frequency of meals (p < 0.05), and in the afternoon with anthropometric measurements (p < 0.05). CONCLUSIONS: Reference values for normal salivary cortisol in healthy children were established. At 45 days it was possible to observe circadian rhythms, which reached maturity at 12 months of life. Sleep and food deprivation increased morning cortisol levels.

Marcadores de diferenciação endócrina para diagnóstico do carcinoma de pequenas células extra-pulmonares / Markers of endocrine differentiation in extra-pulmonary small cell carcinoma

Introducao: estudos recentes confirmam a natureza endocrina do carcinoma indiferenciado de pequenas celulas do pulmao bem como das suas apresentacoes extra-pulmonares. O objetivo do estudo foi comparar a utilidade da Protein Gene Peptide com a enzima enolase neuronio especifica (NSE) o hormonio adrenocorticotropico e a calcitonina na diferenciacao endocrina do carcinoma indiferenciado de celulas extra-pulmonares. Materiais e metodos: analise de dados primarios nao publicados. A tecnica imunohistoquimica utilizada foi atraves do metodo peroxidase-antiperoxidase utilizando anticorpos PGP, NSE, ACTH e calcitonina...

Macroadenomas näo-funcionantes da hipófise: estudo imuno-histoquímico / Functionless pituitary macroadenomas: immunohistochemical study

Cinqüenta e nove adenomas hipofisários, do tipo nao-funcionante, foram analisados pelo método imuno-histoquímico. Os tumores foram estudados através da técnica da peroxidase - avidina - biotina (ABC) e pesquisados os seguintes hormônios, com anticorpos primários específicos: prolactina (PRL), hormônio do crescimento (HS), corticotrofina (ACTH), gonadotrofinas (HCG) e tireotrofina (TSH). Trinta e oito tumores nao reagiram a nenhum anticorpo, 8 tumores apresentaram imunorreaçao positiva à prolactina, 5 tumores eram imunorreativos ao HS, 6 eram imunorreativos ao ACTH, e 10 tumores eram imunorreativos às gonadrotofinas, sendo que 5 ao LH e 5 ao FSH. Dos tumores que apresentaram imunorreatividade ao hormônio do crescimento e à prolactina houve manifestaçao clínica em apenas um, cujo paciente evoluiu com altas taxas de prolactina sangüínea.

Encefalopatia con hipsarritmia sin espasmos infantiles / Infantile encephalopathy with hipsarritmia without spasms

Los niños con encelopatias cronicas pueden presentar retraso del desarrollo psicomotor y en algun momento de su evolucion, crisis de espasmos con tazado electroencefalografico hipsarritmico, constituyendo un sindrome de west sintomatico. Presentamos un analisis y seguimiento evolutivo de 9 niños que, si presentaron hipsarritmia, no sufrieron espasmos. Prevaleciendo en mujeres (8:1), la hipsarritmia comenzo en la mayoria de los pacientes (77.8 por ciento) antes de los meses. El factor etiologico fue, en todos los pacientes, un daño encefalico previo. Clinicamente los niños presentaron examen neurologico anormal, solo 6 niños presentaron convulciones y ninguno presento crisis de espasmos. Los electroencefalogramas mostraron algun tipo de hipsarritmia. Se evalua el resultado del tratamiento con ACTH instaurado. Resaltamos la existencia de hipsarritmia sin crisis de espasmos y destacamos que 3 niños de nuestra serie presentaron, como caracteristica propia distintiva, la ausencia de manifestaciones convulsivas

study on certain hormonal disturbances in breast carcinoma

Seven hormones were studied in 23 cases of cancer breast 16 preoperative and 7 postoperative. The 7 hormones studied were GH, prolactin, T4, T3, ACTH, estrogen and progesterone. Ten matched controls were studied at the same time for comparison. No significant changes were noticed in GH and ACTH, in preoperative and postoperative T4 cases as compared with controls. Significant decrease was noted in preoperative T4 and prolactin and in both preoperative and postoperative in T3 cases and increase in progesterone and estrogen in preoperative and postoperative periods as compared with the control level. Also, GH and ACTH showed significant drop postoperatively as compared with the preoperative as well as control levels. T4 showed a marked decrease in preoperative cases as compared with normal controls and the level return to normal in postoperative period. Follow up of patients with breast carcinoma before and after surgery may have an important role for better understanding of such hormonal changes and thus helps in the study of biological behavior of tumors

Hormonal assay in cases of primary atrophic rhinitis

This study was conducted on 40 cases of primary atrophic rhinitis in comparison with 10 normal control and 10 contact persons. A nasal biopsy had taken aiming to verify the clinical diagnosis and to localize the prostaglandin in this condition using PAP technique in comparison with normal control persons. In this study we found high plasma level of prostaglandin, A.C.T.H and cortisone. But less localization of prostaglandin in the nasal tissue in cases of primary atrophic rhinitis in comparison with normal control persons. This low localization of prostaglandin is due to the unhealthy endothelial cells of the blood vessels that normally synthetize the prostaglandin. The high plasma level of prostaglandin can be explained by the production of prostaglandin from other healthy tissues that triggered by the necrosis. This hight plasma level of prostaglandin results in high level of plasma. A.C.T.H and consequently plasma cortisone. The high level of plasma cortisone may exert inhibitory effect on many immune functions that lowers the local nasal tissue immunity leading to the chronicity of this condition

Imuno-histoquímica hipofisária: metodologia e aplicaçäo / Immunohistochemistry of the pituitary gland: methodology and use

Os autores estudaram a aplicaçäo do método da peroxidase-antiperoxidase para detectar hormônio de crescimento (GH), prolactina (PRL) e corticotrofina (ACTH) em cortes de tecidos normais e de pituitária adenomatosa utilizando anticorpos de radioimunoensaio (RIA). Quatro glândulas pituitárias normais obtidas em autópsia e 21 adenomas pituitárias normais obtidos durante cirurgia de pacientes com acromegalia (16), hiperprolactinemia (2) e doença de Cushing (3) foram estudados. Anti-soros obtidos de carneiros imunizados com preparaçöes altamente purificadas de GH humano, prolactina ovina e ACTH porcino. Reatividades cruzadas de anti-GH com PRL, anti-PRL com GH e anti-ACTH 1-39 com ACTH 1-24 e ACTH 18-39 no RIA foram: 0,6%, 0,03%, 3,1% e 5,7% respectivamente. Detecçäo de cada hormônio foi bem sucedida em todos os cortes estudados de tecido pituitário normal. Melhores colaboraçöes foram obtidas usando diluiçöes primárias do anti-soro mais baixas que aquela rotineiramente empregadas em RIA. Anti-GH mostrou näo ter reatividade cruzada significante com PRL em cortes de tecido pituitário. Anti-PRL, contudo, mostrou alguma reatividade cruzada com GH, mas isto pôde ser evitado por absorçäo prévia do anti-soro com GH. Nenhuma diferença na coloraçäo pôde ser detectada fosse usado ou näo o anti-ACTH depois da imuno-absorçäo com ACTH 1-24. Todos os adenomas pituitários de pacientes acromegálicos mostraram células imunorreativas para GH, porém poucos adenomas tiveram todas ou mesmo a maioria das células positivas para GH. Todos os adenomas obtidos de pacientes com hiperprolactinemia e doença de Cushing coraram-se com anti-soro contra PRL e ACTH, respectivamente. Estes resultados validam o uso dos anti-soros mencionados na imuno-histoquímica da pituitária